《植物生理学报》 2020, 56(3): 529-539

盐生植物花花柴KcSOS1基因RNA干扰遗传转化体系构建及其功能初步 鉴定

张晨, 孟林, 毛培春, 田小霞, 郭强*

北京市农林科学院, 北京草业与环境研究发展中心, 北京100097

通信作者：郭强；E-mail: guoqiang@grass-env.com

摘　要：

盐生植物花花柴(Karelinia caspia)适应盐碱生境的主要策略是通过叶片盐腺将体内积聚过多的Na⁺排出体外而避免盐害, 以增强其耐盐性。然而, 花花柴泌盐分子机制仍不清楚。研究表明, 质膜Na⁺/H⁺逆向转运蛋白SOS1介导的Na⁺外排可能在其泌盐过程中起重要作用。基于此, 本研究以花花柴叶片总RNA为模板, 采用反转录PCR方法获得了KcSOS1干扰片段。采用In-Fusion无缝连接方法, 构建了CaMV35S启动子驱动的含有KcSOS1片段反向重复序列的RNA干扰(RNAi)植物表达载体pART27-KcSOS1-RNAi (PKR)。最后, 通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法, 将PKR转入花花柴, 经抗性筛选及分子检测获得了KcSOS1-RNAi转化株系。初步证实, 盐胁迫下KcSOS1-RNAi株系叶片Na+分泌速率较野生型明显降低。实验结果为揭示KcSOS1在花花柴泌盐中的作用提供参考。

关键词：盐生植物; 花花柴; 质膜Na⁺/H⁺逆向转运蛋白; RNA干扰; 耐盐性

收稿：2019-10-08   修定：2020-01-13

资助：国家自然科学基金(31601991和31971752)、北京市自然科学基金(6152008)、北京市农林科学院科技创新能力建设专项(KJCX20170110)和北京市农林科学院草业种质资源创新团队项目(JNKST201604)。